细胞计数仪
细胞计数仪：CHO 细胞
中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞是一种上皮细胞系，常用于生物学和医学研究。超过 50 年的研究开发，该细胞系已用于遗传学、细胞毒性等多种研究方向。它们由于极易转染，已成为用于产生重组蛋白（包括治疗）备受欢迎的细胞系。
图 1. 使用 SoftMax Pro 软件对 CHO 细胞进行 StainFree 分析
这些图像中的 CHO 细胞按 4000 个细胞/孔的密度铺到 384 孔微孔板中。左侧：为了创建新的 StainFree 分析设置，用鼠标点击图像上的“绘图”，以标注单个细胞（黄色）或非细胞区域（蓝色）。右：紫色掩膜为通过该软件在图像中发现的对象。或者，预定义的图像分析设置可用于对 CHO 细胞计数进行一键分析。
图 2. 免染技术与荧光细胞计数的比较
使用 StainFree™ 细胞检测技术（蓝色）、红色胞核染色（红色）以及绿色全细胞染色（绿色）进行细胞计数。采用所有三种方法得到的计数基本吻合，表明使用 StainFree 技术可获得准确的细胞计数，同时无需荧光染料（每个图中 r > 0.99）。
图 3. 细胞融合度
即将进行转染之前的细胞融合度百分比可使用 StainFree 技术确定。若最初接种密度为每孔 15000 个、10000 个和 5000 个细胞，则在过夜生长后测得的融合度百分比分别为 44、30 和 15。
图 4. GFP 转染后细胞成像
转染后的细胞使用 SpectraMax MiniMax 300 成像细胞计数器的 TL（A、C）和绿色荧光（B、D）通道进行成像。所示细胞按15000 个细胞/孔的密度接种到 96 孔板中。显示了两种转染条件，表示低 (B) 和高 (D) 转染效率。StainFree 技术用于检测单个细胞，随后可分为 GFP 表达呈阳性或阴性。
提示 1：
为了在无染色的情况下对 CHO 细胞进行计数，我使用 SoftMax Pro 软件中的预定义设置“细胞 A”。这对于任何情况下融合度为 5% 至 95% 的 CHO 细胞确实非常有效。我们已经可以得出这样一个结论，极相似样品的 Stain-Free 计数和荧光胞核计数之间高度相关。（见图 2 和 3）。
提示 2：
得到更准确的 StainFree 计数。在用 TL 通道进行成像，而不使用可以尽可能给您提供最清晰图像的对焦调节高度时，尝试将您的对焦调节降低至某个负值更大的位置，例如从 0 至 -20。您希望图像中的细胞具有明亮的中心和黑暗的边缘。这样会为您节省很多时间，而且还可通过预定义分析设置来获得更好的结果。
CHO 细胞分析工具包
- SpectraMax® i3 多功能微孔板检测平台
- SpectraMax® MiniMax™ 300 成像细胞计数仪
- SoftMax® Pro 软件
仪器设置
关于 StainFree 细胞检测技术
细胞成像检测通常需要借助荧光染料对细胞进行标记，但荧光染料会对活细胞产生毒性，或者仅可用于固定的细胞。用于分析细胞计数和细胞融合度的无标记方法可帮助研究人员定量监测细胞增殖和健康状况，无需进行可能会影响细胞活力且耗时的工作流程。
具备 MiniMax 300 细胞成像仪的 SpectraMax i3 多功能微孔板平台采用独特的StainFree 细胞检测技术，让您能够进行细胞增殖、毒性和其他测定，无需使用可与 DNA 相结合的细胞核染色，如 DAPI，或从长远来看确实会对细胞产生毒性的活细胞染料。