抗原/免疫原发现和优化
免疫原开发和疫苗开发的解决方案
疫苗开发工作流程根据所选平台(如灭活病毒与 DNA 疫苗)而大有不同,但各有其自己的优势。流行病防范创新联盟 (CEPI) 和许多其他组织在大流行期间推广这类多样化的方法,以增加成功抵御感染原的可能性。
在这个视频 中,生物制药平台经理 Justin Dranschack 回顾了我们使用重组蛋白作为免疫原的疫苗开发工作流程解决方案,并参考了这些系统以帮助您进行研究。
抗原/免疫原发现工作流程
第 1 步:筛选与病毒特异性抗体的结合
噬菌体展示技术是一种强大的体外方法,可用于筛选数百万种病毒抗原抗体,这些抗体随后会被视为潜在的候选疫苗。
第 2 步:免疫原特征检测
开展免疫原性研究来确定在上一步中检测到的抗原是否会引发免疫反应,因为噬菌体展示技术仅筛选抗原 - 抗体结合。如果抗原引起免疫反应(通常通过 ELISA 测定),则将继续鉴定该抗原(此时被视为免疫原)。在下一阶段,使用其他免疫原特征鉴定法将所需的特性转入免疫原中。
第 3 步:蛋白(免疫原)工程
在注入动物或人体时,一些免疫原特性已知会造成不良影响。因此,使用 CRISPR/Cas9 等基因改造工具来操纵编码免疫原的 DNA,以便使其不再具备这些特性。
第 4 步:细胞转染与克隆
一旦已优化 DNA,就有必要扩大免疫原的产量以进行进一步测试。在这个阶段,至关重要的是生成一个高表达的单克隆性细胞株。这个过程通常涉及上述基因改造技术,以及将单细胞克隆到微孔板中,尤其在使用哺乳动物细胞株的情况下。
第 5 步:筛选质量属性,包括滴度
在单细胞克隆后,监测细胞株的生长并评估蛋白表达。随后纯化并制备免疫原,将其注入动物体内诱导免疫反应。然后在病毒中和实验中筛选该动物产生的抗体以确定疫苗效果。
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