工作流程:质粒生产
 
组装

组装

将靶基因(目标基因)连接成具有所需特征的载体,从而形成重组质粒。这可以通过多种技术来完成,包括 Gibson 组装 (Gibson Assembly) 或 Golden Gate 组装 (Golden Gate Assembly)。

组装工作流程
01
转化
转化工作流程

转化

连接产物被引入感受态细菌细胞中,允许微生物摄取经过改造的质粒并产生多个质粒拷贝。

02
克隆平板接种和筛选

克隆平板接种和筛选

将微生物细胞扩散到固体琼脂板上以生长成单个克隆,然后对其进行筛选,以识别具有所需拣选特征的克隆。

克隆平板接种和筛选
03
>QPix 微生物克隆筛选系统

QPix 微生物克隆筛选系统

克隆拣选

克隆拣选

一旦确定了理想的克隆,就可以从固体琼脂板中将它们拣选并转移到液体培养基中过夜生长和孵育

04
过夜孵育

过夜孵育

将含有液体培养基的生长板密封并转移至振荡孵育箱中,以使微生物分裂,从而产生更多重组质粒拷贝。

过夜孵育
05
添加底物
添加底物

微量制备

裂解微生物以提取重组质粒。然后使用微柱法或微珠法纯化质粒以获得高纯度 DNA

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