活细胞 Gi 和 Gs 偶联 GPCR 第二信使信号传导

活细胞 Gi 和 Gs 偶联 GPCR 第二信使信号传导

通常使用放射性结合等测定或需要细胞裂解的终点 cAMP 测定来检测 Gi 和 Gs 偶联 GPCR 第二信使信号活性。此类检测在细胞反应中的单个时间点测定活性,并且不提供动力学信息。另一种方法是将 Gi 和 Gs 偶联 GPCR 与 Gα16 强制偶联,随后在激动剂受体激活后进行钙离子通道荧光检测。同样,这种检测是次优的,因为它不通过生物相关的 cAMP 通路发出信号。

在这里,我们使用 FLIPR 系统 展示了稳定表达 GloSensor™ 质粒的 CHO-K1 和 HEK-293 细胞系中的内源性受体活性。

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